Title成年大鼠胰岛的体外基因转染
Other TitlesIn vitro gene delivery to rat pancreatic islets by lentiviral vectors
Authors金永柱
曲爱娟
谢蜀生
Affiliation北京大学医学部免疫学系,北京,100083
KeywordsⅠ型糖尿病
胰岛
慢病毒载体
基因治疗
Issue Date2003
Publisher免疫学杂志
Citation免疫学杂志.2003,19,(5),345-348.
Abstract目的探讨携带外源基因的慢病毒在体外有效感染胰岛及外源基因在胰岛中的表达,为通过移植前向胰岛细胞转入特定的免疫调节分子基因诱导胰岛移植物耐受奠定基础.方法将目的基因CTLA4Ig导入慢病毒载体pWPTS,构建成pWPTS-CTLA4Ig载体.用磷酸钙沉淀法将pWPTS-EGFP、pWPTS-CTLA4Ig分别和其辅助载体pMD2.G、pCMV△8.92共转染293T细胞,收获病毒上清液,测定病毒滴度后感染新分离的胰岛.通过Western Blot测定胰岛培养上清液中CTLA4Ig蛋白的表达.结果①成功构建了携带CTLA4Ig基因的慢病毒载体pWPTS-CTLA4Ig;②包装产生的慢病毒Lenti-EGFP、Lenti-CTLA4Ig在体外可以感染胰岛,其中在Lenti-EGFP慢病毒感染的胰岛观察到了绿色荧光,及在Lenti-CTLA4Ig慢病毒感染的胰岛培养上清液中检测到了CTLA4Ig蛋白的表达.结论慢病毒在体外可以有效感染大鼠胰岛,且携带的外源基因可以在胰岛细胞中稳定表达,其中Lenti-CTLA4Ig慢病毒感染的胰岛为进行胰岛移植并诱导体内特异的胰岛移植物耐受奠定了基础.
URIhttp://hdl.handle.net/20.500.11897/164728
ISSN1000-8861
DOI10.3969/j.issn.1000-8861.2003.05.006
Indexed中文核心期刊要目总览(PKU)
中国科学引文数据库(CSCD)
Appears in Collections:基础医学院

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