病理性损伤因素对肾小管上皮细胞表型转化的影响

Abstract

目的:观察低血清、高糖、高蛋白刺激下肾小管上皮细胞向间叶性细胞的表型转化,探讨损伤的肾小管上皮细胞在肾小管间质纤维化中的作用.方法: 以体外培养的人近端肾小管上皮细胞为对象,分别用含低血清(0.2 mol*L-1小牛血清)、高葡萄糖(4.5 g*L-1)、高白蛋白(15 g*L-1)的培养液培养7 d,透射电镜检测细胞形态变化;免疫组化和Western blot检测细胞表型改变,包括CK、Vimentin、α-SMA、Ⅰ和Ⅲ型胶原,原位杂交检测Ⅰ型胶原mRNA表达,同时检测细胞TGFβ1蛋白表达.结果:低血清、高糖、高蛋白直接刺激下,肾小管上皮细胞出现明显形态学改变,包括细胞变为长梭形;透射电镜下细胞内线粒体明显减少,粗面内质网明显增加,并出现actin样微丝.免疫组化染色和Western blot显示CK表达明显减弱,Vimentin、Ⅰ、Ⅲ型胶原、α-SMA和TGFβ1表达增强.原位杂交显示Ⅰ型胶原mRNA表达增强.结论:低血清、高糖、高蛋白可直接引起人近端肾小管上皮细胞TGFβ1表达增加,并发生向间叶性细胞的表型转化.