Title | Ⅱ型B族链球菌表面免疫相关蛋白基因的克隆和原核表达 |
Other Titles | Cloning and Prokaryotic Expression of Gene Encoding Surface Immunogenic Protein ( SIP ) of Streptococcus Group B |
Authors | 岳丽琴 沈叙庄 张华捷 王咏红 俞桑洁 杨永弘 |
Affiliation | 北京儿童医院微生物及免疫室,北京,100045 北京大学医学部基础医院病原生物系,北京,100083 |
Keywords | B族链球菌 表面免疫相关蛋白 原核表达 |
Issue Date | 2006 |
Publisher | 中国生物制品学杂志 |
Citation | 中国生物制品学杂志.2006,19,(3),236-239. |
Abstract | 目的重组表达Ⅱ型B族链球菌表面免疫相关蛋白(Surface immunogenic protein,SIP)基因,为进一步免疫学研究提供目标蛋白.方法用PCR的方法从GBSⅡ型标准株的基因组DNA中扩增出SIP基因,用T/A克隆法将其插入pMD18-T载体,构建原核表达载体pET32a-SIP,用BI21(DE3)/pET系统表达Trix-SIP融合蛋白,SDS-PAGE和质谱分析鉴定表达产物,并对表达蛋白进行初步纯化.结果 PCR扩增产物经测序,证实与GenBank中I a/c型GBS的SIP的基因序列同源性为99%.SDS-PAGE显示,经IPTG诱导后BL21(DE3)/pET32a-SIP总蛋白中出现一条相对分子质量为66 000的新蛋白带.质谱分析和蛋白质库的比较证实其为B族链球菌表面免疫相关蛋白(SIP)的可能性分数为74.结论已成功表达并初步纯化SIP,为SIP在细菌致病中的作用研究以及相关疫苗的制备奠定了基础. |
URI | http://hdl.handle.net/20.500.11897/208019 |
ISSN | 1004-5503 |
DOI | 10.3969/j.issn.1004-5503.2006.03.007 |
Indexed | 中国科学引文数据库(CSCD) |
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