TitleⅡ型B族链球菌表面免疫相关蛋白基因的克隆和原核表达
Other TitlesCloning and Prokaryotic Expression of Gene Encoding Surface Immunogenic Protein ( SIP ) of Streptococcus Group B
Authors岳丽琴
沈叙庄
张华捷
王咏红
俞桑洁
杨永弘
Affiliation北京儿童医院微生物及免疫室,北京,100045
北京大学医学部基础医院病原生物系,北京,100083
KeywordsB族链球菌
表面免疫相关蛋白
原核表达
Issue Date2006
Publisher中国生物制品学杂志
Citation中国生物制品学杂志.2006,19,(3),236-239.
Abstract目的重组表达Ⅱ型B族链球菌表面免疫相关蛋白(Surface immunogenic protein,SIP)基因,为进一步免疫学研究提供目标蛋白.方法用PCR的方法从GBSⅡ型标准株的基因组DNA中扩增出SIP基因,用T/A克隆法将其插入pMD18-T载体,构建原核表达载体pET32a-SIP,用BI21(DE3)/pET系统表达Trix-SIP融合蛋白,SDS-PAGE和质谱分析鉴定表达产物,并对表达蛋白进行初步纯化.结果 PCR扩增产物经测序,证实与GenBank中I a/c型GBS的SIP的基因序列同源性为99%.SDS-PAGE显示,经IPTG诱导后BL21(DE3)/pET32a-SIP总蛋白中出现一条相对分子质量为66 000的新蛋白带.质谱分析和蛋白质库的比较证实其为B族链球菌表面免疫相关蛋白(SIP)的可能性分数为74.结论已成功表达并初步纯化SIP,为SIP在细菌致病中的作用研究以及相关疫苗的制备奠定了基础.
URIhttp://hdl.handle.net/20.500.11897/208019
ISSN1004-5503
DOI10.3969/j.issn.1004-5503.2006.03.007
Indexed中国科学引文数据库(CSCD)
Appears in Collections:医学部待认领

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