TitleIL-6R抗体调节PMMA骨水泥介导的滑膜成纤维细胞MMPs和血管化因子mRNA表达
Other TitlesRegulation of IL-6R antibody on PMMA bone cement mediated mRNA expression of MMPs and vascular factors by synovial fibroblasts
Authors陶可
曾晖
熊奡
唐新宇
张勇
康斌
辛风
桂先革
Affiliation518036,深圳,北京大学深圳医院骨关节科
汕头大学医学院
北京大学深圳医院骨关节科,深圳,518036
KeywordsIL-6R抗体 聚甲基丙烯酸甲酯 骨水泥 滑膜成纤维细胞 基质金属蛋白酶-1 基质金属蛋白酶-3 血管内皮生长因子 血小板衍生生长因子
Issue Date2011
Publisher中国骨质疏松杂志
Citation中国骨质疏松杂志.2011,17,(6),477-483.
Abstract目的 探讨IL-6R抗体对PMMA骨水泥介导的滑膜成纤维细胞MMP-1和MMP-3、VEGF和PDGF mRNA表达的调节.方法 从全髋关节置换术中获取滑膜组织消化并传代培养.倒置相差显微镜对滑膜细胞进行形态学观察,免疫细胞化学(SABC法)染色对滑膜成纤维细胞进行鉴定.根据加入不同培养物,实验分为3组:PMMA组:75μg/mL PMMA骨水泥颗粒;IL-6R抗体组:10 ng/mL IL6R抗体+75μg/mL PMMA骨水泥颗粒;空白对照组.采用细胞计数试剂盒-8(Cell Counting Kit-8,CCK-8)检测IL-6R抗体、PMMA对滑膜成纤维细胞增殖活力影响;实时荧光定量PCR(real time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,FQ-PCR)检测MMP-1、MMP-3、VEGF和PDGF mRNA 表达.结果 原代滑膜细胞贴壁后,初期为短梭形.连续3次传代后,95%以上细胞为长梭形成纤维细胞样细胞.SABC法染色检测结果显示:上述成纤维样细胞抗CD68抗体阴性,抗vimentin抗体呈棕黄色,为阳性反应.CCK-8检测显示:与PMMA组和空白对照组相比,IL-6R抗体组吸光度(A)值明显降低(P<0.01);而空白对照组与PMMA组间吸光度(A)值无统计学差异(P>0.05).FQ-PCR 检测发现:与PMMA组和空白对照组相比,IL-6R抗体组中MMP-1和MMP-3、VEGF和PDGF mRNA 的表达明显受到抑制(P<0.01);PMMA组中MMP-1和MMP-3、VEGF和PDGF表达较空白对照组升高(P<0.05).结论 IL-6R抗体能显著抑制滑膜成纤维细胞MMP-1和MMP-3、VEGF和PDGF mRNA的表达,为生物制剂预防和治疗假体无菌性松动提供分子生物学的理论依据.
URIhttp://hdl.handle.net/20.500.11897/227147
ISSN1006-7108
DOI10.3969/j.issn.1006-7108.2011.06.004
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