Title | AD7c-NTP与麦芽糖结合蛋白的融合表达,纯化及其抗血清制备 |
Other Titles | Expression, Purification and Antiserum Preparation of AD7c-NTP Fused with Maltose Binding Protein |
Authors | 李荣贵 汪靖超 刑伟 王帅 赵仁亮 吴光耀 |
Affiliation | 青岛大学生物系,山东,青岛,266071 青岛大学医学院附属医院,山东,青岛,266003 北京大学生命科学学院,北京,100871 |
Keywords | 麦芽糖结合蛋白AD7c-NTP融合蛋白 表达 纯化 抗血清 |
Issue Date | 2005 |
Publisher | 药物生物技术 |
Citation | 药物生物技术.2005,12,(4),214-218. |
Abstract | 人工合成了编码AD7c-NTP的基因,并将其中的6种密码子GGA AGG AGA ATA CTA CCC分别突变成大肠杆菌偏爱密码子GGT CGT CGT ATC CTG CCG,PCR扩增后克隆到表达载体pMAL-c2上,构建表达质粒pMAL-AD7c,重组质粒导入E.coli BL21(DE3)构建工程菌,IPTG诱导实现了MBP-AD7c-NTP融合蛋白在工程菌中的高效表达,细胞裂解液经Amylose-resin亲和层析、DEAE-Sepharose离子交换层析以及Su-perdex 200凝胶过滤层析,得到了电泳纯的融合蛋白.纯化的融合蛋白免疫家兔制备了兔抗MBP-AD7c-NTP融合蛋白的抗血清,利用该抗血清及点杂交技术,初步分析了10例AD疑似患者的尿样,结果表明5例疑似患者的尿样呈阳性,另5例呈阴性. |
URI | http://hdl.handle.net/20.500.11897/268310 |
ISSN | 1005-8915 |
DOI | 10.3969/j.issn.1005-8915.2005.04.002 |
Indexed | 中国科学引文数据库(CSCD) |
Appears in Collections: | 生命科学学院 |