Title人心肌肌球蛋白轻链基因启动子驱动的GFP和Luc报告基因在人心肌细胞系中的表达
Other TitlesExpression of GFP and Luc reporter genes driven by human myocardial myosin light chain gene promoter in human cardiomyocytes
Authors许秀芳
辛毅
汪劲松
赵莉敏
杜兰萍
葛桂玲
李娜
张颖
王世强
黄益民
罗毅
Affiliation首都医科大学附属北京安贞医院,北京市心肺血管疾病研究所细胞与分子生物学研究室,北京,100029
首都医科大学附属北京安贞医院,北京市心肺血管疾病研究所实验中心,北京,100029
北京放射医学研究所,北京,100850
北京中医药大学电镜室,北京,100029
北京大学生命科学学院,北京,100871
首都医科大学附属北京儿童医院心外科,北京,100045
Keywords肌球蛋白轻链
绿色荧光蛋白
萤光素酶
心肌细胞
Issue Date2012
Publisher中国病理生理杂志
Citation中国病理生理杂志.2012,28,(9),1722-1728.
Abstract目的:构建人肌球蛋白2v基因启动子(pMLC2v)驱动的绿色荧光蛋白(GFP)和萤光素酶(Luc)报告基因慢病毒载体并观察其在人心肌细胞系(HCM)和人肺癌细胞株A549中的整合表达特征.方法:应用去毒化的人类I型免疫缺陷病毒和pMLC2v-GFP或pMLC2v-Luc报告基因构建慢病毒示踪载体,转染HCM和A549细胞,激光共聚焦显微镜及生物发光检测仪观察2种报告基因在不同细胞生长进程中的表达特征.非特异性启动子驱动的GFP(GFPC)和红色荧光蛋白(RFPC)报告基因作为对照.结果:2种细胞转染GFPC和RFPC后第3 d,都表达GFP和RFP;而HCM只在转染pMLC2v-GFP和pMLC2v-Luc 21 d后表达GFP和Luc,A549细胞不表达.结论:pMLC2v主要在培养21 d后新增殖的人心肌细胞中驱动GFP和Luc报告基因表达,这为监测干细胞向心肌细胞的分化进程提供了可靠的病理及活体示踪工具.
URIhttp://hdl.handle.net/20.500.11897/286818
ISSN1000-4718
DOI10.3969/j.issn.1000-4718.2012.09.035
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