金黄地鼠视神经切断后视网膜及视觉通路的形态学观察

Abstract

该试验主要目的是系统观察视神经切断后长期存活视网膜节细胞的形态学特征及其时程变化,并观察视神经切断后视网膜及脑内视觉通路中HSP27表达的情况,探讨长期存活的节细胞及视觉通路与HSP27之间可能存在的联系.该试验选用成年金黄地鼠(Golden Hamster)在距离眼球2mm处切断视神经,立即用蘸有6％荧光会的明胶海绵置于视神经断端处,逆行标记视网膜节细胞.动物分别存活2天,1、2、3、4、5、6、8周后,用视网膜平铺技术在荧光显微镜下观察存活节细胞形态,并计数存活节细胞数目.视神经切断动物存活1、2、3、4、5、6、8周后,取眼球和脑制作冰冻切片,进行免疫细胞化学染色,观察视网膜、视交叉、视束、外侧膝状体和上丘等部位HSP27表达的情况.实验结果显示,距离眼球2mm切断视神经后,前2周视网膜节细胞死亡速度较快,失去的节细胞数占细胞总数的85％;后6周节细胞死亡速度较慢,失去的节细胞数占细胞总数的10％左右.但到视神经切断后8周仍有大约2％的节细胞存活.免疫细胞化学染色结果显示,视神经切断后损伤同侧视网膜以及对侧视交叉、视束、外侧膝状体和上丘出现HSP27的阳性表达,并且术后1周阳性表达最强,以后免疫细胞化学染色程度逐渐转弱,但阳性表达可一直持续到术后第8周.该研究说明,眶内视神经切断后少量节细胞可存活较长时间,受损伤的视网膜和视觉通路出现HSP27的表达,并且可持续表达8周以上.该实验结果提示,受损视网膜和视觉通路中HSP27的表达与视神经损伤密切相关,但是这种表达对受损视觉系统的生物学作用尚待进一步研究.