半乳糖凝集素1在脐带来源间充质干细胞调控类风湿关节炎患者T细胞功能中的作用

Abstract

目的:明确半乳糖凝集素l(galectin-1)在脐带间充质干细胞(umbilical cord mesenchymal stem cells,UCMSCs)调控类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者T细胞功能中的作用.方法:应用慢病毒构建galectin-1低表达的UC-MSCs,即UC-MSCs(Gal-1-),采用直接接触培养方式分别将UC-MSCs、UC-MSCs(Gal-1-)与RA患者的CD4+T细胞共培养.设立阴性对照组(CD4+T)、阳性对照组[CD4+T培养过程中加入植物血凝素(phytohaemagg lutinin,PHA)2 mg/L]、UC-MSCs-CD4+T共培养组、UC-MSCs(对照shRNA)-CD4+T共培养组及UC-MSCs (Gal-1-)-CD4+T共培养组.MTS法检测CD4+T细胞增殖,ELISA方法检测共培养上清液中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorsα,TNF-c)水平,流式细胞术检测Th1/Th2/Th17细胞亚型.结果:UC-MSCs和UC-MSCs (对照shRNA)与CD4+T细胞共培养组可显著抑制PHA诱导的CD4+T细胞增殖及TNF-α表达,而UC-MSCs(Gal-1-)组对此无明显抑制作用.与阴性对照组(8.51％±2.04％)相比,UC-MSCs及UC-MSCs(对照shRNA)组可显著抑制Th1细胞分化(分别为4.83％±1.37％和5.13％±0.87％,P值分别为0.012和0.018),而UC-MSCs(Gal-1-)组对此无明显抑制作用(6.41％±0.96％,P=0.101).与阴性对照组相比,UC-MSCs及UC-MSCs(对照shRNA)组可上调Th2并下调Th17比例,但差异并无统计学意义,UC-MSCs(Gal-1-)组的这一作用不明显.结论:UC-MSCs可抑制RA患者CD4+T细胞的增殖、活化并可降低Th1细胞比例,但敲低galectin-1分子的表达后该作用减弱,提示galectin-1参与了UC-MSCs抑制RA患者CD4+T细胞功能的过程.